毛細(xì)管柱只有正確的安裝,才氣保證其*的性能以及延長使用壽命。正確安裝請參考以下步調(diào)。
步調(diào)1:檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊以及襯管等。檢查氣體過淋器以及進(jìn)樣墊,保證輔助氣以及檢驗(yàn)測定器的通氣暢通,要是之前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需要將進(jìn)樣口的襯管洗濯或改換。
步調(diào)2:將螺母以及密封墊裝在色譜柱上,并將色譜柱兩端警惕切平,切面要平滑整潔。
步調(diào)3:將色譜柱毗連于進(jìn)樣口上。 色譜柱在進(jìn)樣口中插進(jìn)去的深度應(yīng)按照所使用的GC儀器不同而定,正確合適的插進(jìn)去能zui大可能地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。通常,色譜柱的進(jìn)口應(yīng)連結(jié)在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過隔墊純粹插進(jìn)去進(jìn)樣口后針尖與色譜柱進(jìn)口相距1~2cm,(具體的插進(jìn)去水平以及要領(lǐng)參考所使用GC的隨機(jī)手冊)。
避免使勁彎曲擠壓毛細(xì)管柱,并警惕不要讓標(biāo)志牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)管柱接觸摩擦,以防毛細(xì)管柱斷裂受損。
色譜柱正確插進(jìn)去進(jìn)樣口后,將毗連螺母擰上,擰緊后(用手?jǐn)Q不動(dòng)了)用板子再多擰1/4-1/2圈,保證安裝的密封水平。不精密的安裝,不僅會(huì)引起裝置的泄漏,并且可能對色譜柱造成*損壞。
步調(diào)4:接通載氣。 當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,通入載氣,調(diào)治柱前壓以患上到合適的載氣流速。
將色譜柱的出口端插進(jìn)去裝有已經(jīng)烷的樣口瓶中,正常情況下可以看見瓶中穩(wěn)定連續(xù)的氣泡。要是沒有氣泡就要從頭檢查載氣裝置以及流量控制器等是否設(shè)置正確,并檢查整個(gè)氣路有沒有泄漏,待所有問題目解釋題決后,將色譜柱出口從瓶中取出,保證柱端口無溶劑殘留,再進(jìn)行下一步的安裝。
步調(diào)5:將色譜柱毗連于檢驗(yàn)測定器上。 色譜柱與檢驗(yàn)測定器的毗連安裝以及所需注意的事項(xiàng)以及色譜柱與進(jìn)樣口毗連大抵相同。要是在應(yīng)用中體系所使用的ECD或NPD等,那末在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將色譜柱與檢驗(yàn)測定器斷開,這樣檢驗(yàn)測定器可避免被污染。
步調(diào)6:確定載氣流量,再對色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。 注意:要是不通入載氣就對色譜柱進(jìn)行加熱,會(huì)迅速且*性的損壞色譜柱。
步調(diào)7:色譜柱的老化。 色譜柱安裝以及體系檢漏事情完成后,就可以對色譜柱進(jìn)行老化,對色譜柱加熱至一永恒固定溫度,通常取其溫度上限。時(shí)會(huì)下,可加熱至高于無上使用溫度10~20℃左右,可是是不克不及超過色譜柱的溫度上限不然極易損壞色譜柱。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,記載并觀察基線,初始階段基線應(yīng)連續(xù)上漲,在達(dá)到老化溫度后5~10min起頭降落,并且會(huì)連續(xù)分鐘,當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來。要是在小時(shí)后基線仍無法穩(wěn)定,或在15~20分鐘后仍無較著的降落趨向,那末可能體系裝置有泄漏或污染。遇到這樣的情況,應(yīng)立行將柱溫降到40℃以下,盡快地檢查體系并解決相關(guān)的問題,要是照舊繼續(xù)老化,不僅對色譜柱有損壞并且始末患上不到正常穩(wěn)定的基線。
一般來講,涂有極性固定相以及較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長,而弱極性固定以及較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化要領(lǐng)有各不相同,須按色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化。
PLOT柱的老化步調(diào):
AT·Pora系列 250℃ 8h以上
摩爾cular Sieve(分子篩) 350℃ 12h
Alumina(氧化鋁) 200℃ 8h以上
因?yàn)樗谘趸X以及分子篩PLOT柱中的不可逆吸附,要患上這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移,當(dāng)柱子分散過含有高水份樣品后,需要將色譜柱從頭老化,以除去固定相中吸附的水分。
步調(diào)8:設(shè)置確認(rèn)載氣流速。 對毛細(xì)管色譜柱使用載氣高純凈度氮?dú)饣驓錃猓d氣的純凈度大于99.95%,而其中的含氧量越小越好。
要是您使用的是毛細(xì)管色譜柱,那末依照載氣的均等線速度(cm/s),而不是利用載氣流量(ml/min)來對載氣做出評價(jià),因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣均等線速度。推薦均等線速度值:氮?dú)猓?0~20cm/s 氫氣:20~25cm/s
在載氣的管線中加入氣體過淋裝置不僅可以延伸色譜柱生存的年限,并且很洪流平地減低了配景噪音,建議安裝一個(gè)高容量脫氧管以及一個(gè)載氣凈化器。使用ECD體系時(shí),能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。
步調(diào)9:柱流掉檢驗(yàn)測定。 在色譜柱老化過程結(jié)束后,采用步伐升溫作一次空白試驗(yàn)(不進(jìn)樣),通常為以10℃/min從50℃升到無上使用溫度,達(dá)到無上使用溫度后連結(jié)10min,這樣咱們就會(huì)患上到一張流掉圖。這些個(gè)數(shù)值可以后尷尬刁難比試驗(yàn),并且對實(shí)驗(yàn)問題的解決有幫忙。
在空白試驗(yàn)的色譜圖中,不該該有色譜峰呈現(xiàn),要是呈現(xiàn)了色譜峰,通常多是從進(jìn)樣口帶來的污染物。要是在正常的使用狀況下,色譜柱的性能起頭降落,基線的旌旗燈號值會(huì)增高。別的,要是在較低的溫度下,基線旌旗燈號值較著大于初始值,那末多是色譜柱以及體系有污染。
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