淺談陰離子交換色譜柱清洗溶劑的選擇
更新時(shí)間:2019-03-12 點(diǎn)擊次數(shù):2549
陰離子交換色譜柱是以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì),通過(guò)使用高純度鍵合試劑在硅膠上鍵合季銨強(qiáng)陰離子交換基團(tuán),具有季銨和苯基官能團(tuán)的混合化學(xué)結(jié)構(gòu)。這種強(qiáng)陰離子交換相與疏水相的混合模式可以為各種有機(jī)化合物如芳香族或脂肪族羧酸和磺酸等提供和高選擇性的分離。硅膠:球形,高純度(金屬雜質(zhì)10ppm)
陰離子交換色譜柱的操作壓力是不能超過(guò)色譜柱說(shuō)明書中規(guī)定的大壓力的,否則會(huì)造成色譜不可逆損失。
陰離子交換色譜柱的啟動(dòng)采用標(biāo)準(zhǔn)淋洗液(一般指等淋洗條件)使淋洗達(dá)到平衡后,進(jìn)行色譜標(biāo)準(zhǔn)陰離子的測(cè)試分離度和重視性。
爐子子色譜柱的儲(chǔ)放一般情況下,可以采用標(biāo)準(zhǔn)淋洗液作為儲(chǔ)備液,長(zhǎng)期儲(chǔ)備需要將色譜柱兩端密封。但對(duì)于非抑制型離子色譜柱或早期的抑制型離子色譜柱,由于所有淋洗液比較接近中性,用淋洗液儲(chǔ)放易于長(zhǎng)霉,因此需要用高PH值的溶液作儲(chǔ)備液,或者的淋洗液中加入防霉劑作儲(chǔ)備液。
對(duì)于陰離子色譜,通常有三種清洗方式,分別用于清洗酸溶性,堿溶性或有機(jī)污染物,在清洗過(guò)程中必須要確保嚴(yán)格按照清洗過(guò)程進(jìn)行,否則會(huì)引起色譜柱的局部高壓而損壞色譜柱。對(duì)于有機(jī)溶劑的清洗色譜柱,需要逐步減少有機(jī)溶劑的量以避免由于混合而造成的流動(dòng)相黏度的度化。
陰離子交換色譜柱清洗溶劑的選擇
對(duì)低價(jià)親水污染物:用10倍的淋洗液;
對(duì)高價(jià)親水污染物:用1-3mol/L的鹽酸作淋洗液
對(duì)金屬污染物:會(huì)引起色譜不對(duì)稱性,如鐵離子會(huì)引起硫酸根和磷酸根的拖尾,鋁會(huì)引起磷酸根回收率降低,可采用絡(luò)合劑酸類,如0.2mol/L草酸;
有機(jī)污染物:有機(jī)污染物會(huì)引起色譜柱效降低,可以采用兼容的有機(jī)溶劑清洗,有時(shí)也可以采用高濃度的鹽酸與有機(jī)溶劑混合清洗更為有效,如200mmol/L鹽酸和80%乙腈,但要注意各種溶液要混合后立即使用,長(zhǎng)時(shí)間混合會(huì)造成酸的分解并且損壞色譜柱。要特別注意色譜柱有機(jī)兼容性,如果該色譜柱只能對(duì)15%的有機(jī)溶劑兼容,這時(shí)有機(jī)溶劑濃度就不能超過(guò)15%。