液相色譜儀主要由四大部分組成:柱溫箱(包括進(jìn)樣閥)、高壓輸液泵、檢測器、工作站。
(1)柱溫箱及進(jìn)樣閥容易出現(xiàn)的問題是:溫控儀失靈,不能正確控制柱溫箱的溫度,這時只要更換一下溫控儀就可以了,溫控儀只在各樣品系統(tǒng)適用性試驗中有溫控要求時應(yīng)用,如果無要求,就不必開啟;漏液,如發(fā)現(xiàn)對照品和樣品的出峰時間都不規(guī)律,而且每次的出峰面積也差別很大,根本無法對樣品進(jìn)行定性和定量,這時候需要檢查色譜柱和各金屬細(xì)管的連接處,可能是連接處的塑料套因連接時未按要求而變形了,因其一旦變形就沒法修復(fù),所以換一個新的,按要求套上即可。
?。?)高壓輸液泵容易出現(xiàn)的問題是:壓力升不上去:檢查一下桌面上是否有漏下的液滴,如果有擰緊漏液處即可。壓力過高:看一下抽取流動相的塑料管里是否有氣泡,如果有,則按一下Stop,這時候千萬別抽氣泡,等壓力降下來,到0Psi,這時候抽出氣泡。如果在過高的壓力下抽氣泡,后果會非常嚴(yán)重,流通池會被鼓破,無法分析樣品,并且會給你帶來很多困惑,當(dāng)然如果有經(jīng)驗的話會及時發(fā)現(xiàn),因為流通池破了后會流出藍(lán)色的墨水樣的液體。
(3)檢測器容易出現(xiàn)的問題:流通池:以上已經(jīng)提過了,如果流通池破了,則需要及時更換。氘燈:氘燈的壽命一般為2000h,如果檢測器打不開了,則說明氘燈超過其使用期限,需要更換了。在日常檢測中,一般在進(jìn)樣品之前開啟檢測器,樣品分析完畢,及時關(guān)閉檢測器,這樣可以延長其使用年限,避免不必要的浪費。
?。?)工作站容易出現(xiàn)的問題:安裝工作站的電腦一般不要進(jìn)行其他的工作,一旦出現(xiàn)問題,則需重新安裝。
液相色譜儀色譜柱的填充物的填充辦法:
1.所有材料均達(dá)到規(guī)定溫度。
2.用所需的溶液沖洗柱底部以除去氣泡,并確保柱網(wǎng)下沒有氣泡關(guān)閉色譜柱出口,并將1-2cm的緩沖液留在柱管中。
3.溫和重懸填充物。
4.估計需要的懸濁液(重懸的填充物)總量。
5.向塔中加入所需體積的混合物,并用玻璃棒排干,以免產(chǎn)生氣泡。
6.立即用該欄填充緩沖區(qū)。
7.安裝立柱頂部并將立柱連接至泵。
8.打開柱口,設(shè)定泵的流量。如果混合物的體積大于柱的體積,則應(yīng)連接一個額外的玻璃柱以供儲存。這樣使得混合物在填充時的直徑維持恒定,從而減少紊流并提高柱子的填充狀態(tài)。
9.在達(dá)到柱床高度后,保持填料流量至少為柱體積的3倍,并在柱上標(biāo)記柱床的高度。
10.關(guān)閉泵和塔出口,取下上蓋,向塔內(nèi)注入緩沖液,使其向上凸起。
11.將接頭以一定角度插入到柱中以確保網(wǎng)下無氣泡。
12.沿立柱向下滑動接頭(打開接頭出口),直到達(dá)到標(biāo)記的位置,并且接頭已鎖定并填滿